MALDI質(zhì)譜分析作為一種對(duì)生物組織切片的目標(biāo)生物分子直接分析方法近年來已受到關(guān)注(諸如小分子代謝物、脂質(zhì)、肽、蛋白)。它被期望應(yīng)用于搜索位于疾病部位的生物標(biāo)記物。一般來說,將冰凍切片作為待分析的組織切片。通過MALDI方法,前處理裝置(比如CHIP-1000)可以統(tǒng)一地將基質(zhì)溶液打印在組織切片上。在添加過基質(zhì)以后,MALDI-TOF質(zhì)譜分析組織切片并檢測(cè)目標(biāo)生物分子的m/z。在疾病的生物標(biāo)志物研究中,對(duì)比損傷部位和正常部位的質(zhì)譜峰變化來搜尋特征質(zhì)譜峰作為生物標(biāo)志物。
這里有一個(gè)例子,用MALDI-TOF直接檢測(cè)用藥后肝組織切片的磷脂變化,肝組織切片來自用過四氯化碳導(dǎo)致肝受損的小鼠。
對(duì)5周大的ICR小鼠腹腔注射給藥四氯化碳(1.0 mL/kg)。 分別在15分鐘和48小時(shí)后解剖,并將肝組織用蘇木素伊紅染色。(在給藥48小時(shí)后的肝組織中央靜脈附近確認(rèn)有壞死及細(xì)胞浸潤(rùn))
相應(yīng)的冰凍切片通過前處理裝置用CHCA基質(zhì)處理,然后用MALDI-TOF直接分析。
CV: 中央靜脈; PV: 門靜脈; 黃圈: 細(xì)胞浸潤(rùn)
MALDI-TOF對(duì)冰凍組織切片直接分析結(jié)果
四氯化碳給藥48銷售后MALDI-TOF直接對(duì)冰凍組織切片分析獲得的質(zhì)譜峰代表性地揭示了譜峰變化。
MS和MS/MS分析鑒定這些峰是質(zhì)子化的卵磷脂(PC)PC 32:0,PC 34:2,PC 34:1和加鉀分子。
這些波動(dòng)的相關(guān)對(duì)比顯示了3種磷脂成分的生物統(tǒng)計(jì)性變化,在給藥四氯化碳以后。一般來說,四氯化碳給藥引起的肝受損小鼠模型已知用于研究急性肝細(xì)胞壞死到肝細(xì)胞分裂并再生。
這種直接的質(zhì)譜分析實(shí)現(xiàn)了從組織切片里直接檢測(cè)到肝再生的磷脂變化特征。